Aniston, Sherman Oaks, Los Angeles'ta doğdu. Babası Girit adasında doğup 2 yaşında ailesiyle ABD'ye göç etmiş olan aktör John Aniston (Giannis Anastasakis), annesi ise kısa bir dönem oyunculuk yapmış aktris Nancy Dow'dur. Çocukluğunda 1 yıl kadar Yunanistan'da yaşayan aktris New York'ta büyüdü. 80'li yıllarda ufak rollerde oynamaya başlayan Aniston, çeşitli dizi ve filmlerde rol aldı. 1994'te başlayan 'Friends' dizisindeki Rachel Green rolüyle büyük bir şöhrete ulaştı. Bu rol ona 2003'te bir Altın Küre ödülü kazandırdı.

2000'li yıllarla birlikte sinemaya daha fazla ağırlık veren Aniston, 2003'te Aman Tanrım (Bruce Almighty) filminde Jim Carrey ile, 2008'de Marley & Me filminde Owen Wilson'la birlikte rol aldı. Patrondan Kurtulma Sanatı ve Bu Nasıl Aile (We're the Millers) gibi birçok komedi filminde oynadı.

2000 yılında Amerikalı oyuncu Brad Pitt ile evlenen Aniston, 5 yıl süren bir evliliğin ardından 2 Ekim 2005'te boşandı. Pitt kısa bir süre sonra, o dönem rol aldığı Bay ve Bayan Smith filminden rol arkadaşı Angelina Jolie ile birlikte olmaya başladı. Aniston ise 2012 yılında oyuncu-senarist Justin Theroux ile nişanlandı ve 2015 Ağustos ayında evlendi.