Ashley Greene, Florida'nın Jacksonville kentinde doğdu. Sigortacı Michele Tatum Greene ve eski bir denizci olan Joe Greene'in kızıdır. Joe adında bir de erkek kardeşi bulunmaktadır. Jacksonville ve Florida'nın bir başka kenti olan Middleburg'da büyüyen Greene University Christian School ve Wolfson Lisesi'nde okudu. Liseyi erken bitirip 17 yaşında iken oyunculuk hayatına atılmak için Los Angeles'a taşındı. İlk başta mankenlik hayali olsa da boyunun kısa olması nedeniyle oyunculuğa yönelmiş, sevince de kariyerini bu yönde sürdürmeye karar vererek oyunculuk dersleri almıştır. Çeşitli dizilerde küçük roller aldıktan, Crossing Jordan ve Punk'd gibi TV programlarına konuk olduktan sonra büyük çıkışını Stephanie Meyer'in kitaplarından uyarlanan Alacakaranlık serisiyle yaptı. 2008'de ilki, 2012'de sonuncusu gösterime giren Alacakaranlık serisinin 5 filminin tamamında Edward Cullen'ın evlatlık kardeşi Alice'i canlandırmış, tüm dünyada bu rolle popüler olmuştur. Sonrasında ise Keşke Burada Olsam, Staten Island Summer, In Dubious Battle gibi filmlerde oynamıştır.
2016'nın sonlarında, Paul Khoury ile nişanlanmıştır.